Rezultatele proiectului
Rezultate obtinute in cadrul Fazei 3. (Decembrie 2016)
-
Investigarea comportamentului AuNPs obtinute prin metode prietenoase mediului – green chemistry – in momentul imersarii in medii de cultura celulara DMEM si RPMI – analiza influentei compozitiei mediului de cultura asupra formarii complecsilor proteine/NPs, ca prim pas in evaluarea efectelor toxicologice
 |
 |
Imagine TEM a AuNPs obtinute prin reducerea mierii de albine |
In momentul expunerii AuNPs in mediul de cultura aparitia → unei coroane de proteine |
Coroana de proteine |
 |
 |
Imagini TEM ale AuNPs obtinute prin metode eco-fiendly si imersate in DMEM- coroana de proteine ce inconjoara AuNPs |
| |
|
| |
|
- Interactiunile de la suprafata AuNPs si proteinele din compozitia mediilor de cultura celulara – DMEM, RPMI analizate prin spectroscopia FT-IR. Este confirmata adsorbtia proteinelor pe suprafata AuNPs si formarea coroanei de protein
............................. |
Spectrele FT-IR ale AuNPs preparate si imersate in mediile de cultura celulara |
- Stabilitatea si starea de aglomerare/agregare a AuNPs in medii – analizate cu ajutorul Dynamic Light Scaterring (DLS)/Electrophoretic Light Scaterring (ELS)
Concentration
(µg/ml) |
Hydrodinamic diameters (dH)
(nm) |
PdI |
ζ- potential
(mV) |
Electrophoretic mobility
(cm2/Vs) |
25 |
260.8 |
0.146 |
-13.06 |
-11.2373e-004 |
50 |
363.4 |
0.232 |
-8.33 |
-7.876e-005 |
100 |
434.8 |
0.220 |
-5.43 |
-5.134e-005 |
Comparatie intre dH ale AuNPs dispersate in RPMI, DMEM si NaCl |
Variatia dH pentru
AuNPs imersate in DMEM la diferite concentratii |
 |
 |
- Sinteza AuNRs
 |
Imagini TEM ale AuNRs |
 |
| |
Spectrul UV ale AuNRs la timpi diferiti de reactie |
 |
**************************
Rezultate obtinute in cadrul Fazei 1. (Decembrie 2014)
- Activitate I.2. Stabilirea setului de analize fizico-chimice necesare si a protocoalele de caracterizare a dispersiilor de nanoparticule
 |
Imagini TEM a AuNPs preparate dispersate in apa, folosind acidul folic drept stabilizator |
- Activitate I.3. Stabilirea setului de teste in vitro/in vivo – selectia liniilor celulare/ mediilor biologice si concentratiile de NPs de interes
Studiile toxicologice in vitro vor fi efectuate pentru evaluarea interactiunilor dintre MeNPs si celule, cu scopul de a intelege procesele complexe care guverneaza asimilarea celulara si comportamentul intracelular al nanoparticulelor, si de a oferi un mijloc rapid si eficient pentru evaluarea nanoparticulelor pentru un numar de produse finale cu efect toxicologic.
Luand in considerare faptul ca interesul partenerului industrial vizeaza aplicatii cosmetice, unde MeNPs pot induce fenomene de iritare si inflamare, in special in urma aplicatiilor topice, vor fi efectuate si teste in vivo de iritabilitate a pielii, pe langa cele in vitro de viabilitate si functionalitate care sa permita analiza interactiei MeNPs cu celulele. |
|
- Activitate 1.4 Evaluare a sintezei preliminare de nanoparticule
Obtinerea nanoparticulelor metalice din precursori sub forma de saruri.
Testele preliminare de toxicitate a solutiilor stoc initiale- au ca scop, urmarirea pe termen scurt a efectului Au NPs cu dimensiuni de 8-10 nm asupra viabilitatii si proliferarii liniei celulare de fibroblasti L929 si daca prezenta citratului folosit drept stabilizator, afecteaza viabilitatea celulelor studiate. |
|
Viabilitatea celulelor de fibroblasti L929 tratate cu Au NPs pentru diferiti timpi (24, 48 si 72 h) |
In final s-a putut observa existenta unei limite in ceea ce priveste concentratia AuNPs pentru care viabilitatea celulara scade destul de mult. |
**********************************
Rezultatele asteptate ale acestui proiect sunt:
- in ceea ce priveste dezvoltarea tehnologica, din punct de vedere experimental, vor fi obtinute AuNPs, AgNPs si PtNPs de diferite dimensiuni/forme, de interes pentru dezvoltarea produselor de ingrijire a pielii, utilizand atat metode conventionale de reducere chimica, cat si metode prietenoase mediului, de tipul‚ „green chemistry’.
Se urmareste obtinerea de dispersii coloidale stabile si omogene de nanoparticule metalice, cu dimensiuni intr-un anumit interval, folosind ambele cai de sinteza; de asemenea se va avea urmari functionalizarea suprafetei, cu rol determinat asupra stabilitatii, solubilitatii si proprietatilor optice in diferite medii.
- pentru studiul proprietatilor nanoparticulelor, vor fi utilizate echipamente avansate de caracterizare si de asemenea vor fi folosite teste de nanotoxicologie specifice, in vitro, pentru indeplinirea obiectivului final propus in acest proiect, oferind un sprijin puternic pentru o decizie corecta. Mai mult, acest proiect are scopul de a extinde utilizarea metodelor avansate, de ultima ora.
Pe scurt, acest proiect ia in considerare urmatoarele aspecte:
¤ o crestere a interesului organizatiilor nationale si internationale de reglementare;
¤ reticenta companiilor si producatorilor de a dezvolta produse si tehnologii pe baza de NPs in absenta unor standarde clare de siguranta;
¤ domeniul de cercetare al nanotoxicologiei aflat in curs de dezvoltare;
¤ evaluarea toxicologica a NPs implica un efort de cercetare complex, datorita multitudinii de variabile
¤ necesitatea de a gasi contramasuri eficiente pentru potentialele pericole asociate NP;
¤ utilizarea metodelor de sinteza prietenoase cu mediul, ca o cale de diminuare/eliminare a efectelor adverse ale NP asupra sanatatii si mediului
[inapoi la pagina principala] |
